影响分离的因素与提高
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柱效的途径:
(1)液体的黏度比气体大一百倍,密度为气体的一千倍左右,故降低传质阻力是提高柱效主要途径。
(2)由速率方程,降低固定相粒度可提高柱效。
(3)液相色谱中,不可能通过增加柱温来改善传质。
(4)恒温改变淋洗液组成、极性是改善分离的最直接的因素。
(5)流速大于0。5cm/s时,H~u曲线是一段斜率不大的直线。降低流速,柱效提高不是很大。但在实际操作中,流量仍是一个调整分离度和出峰时间的重要可选择参数。
(6)气相色谱中的固定液原则上都可以用于液相色谱,其选用原则与气相色谱一样。但在高效液相色谱中,分离柱的制备是一项技术要求非常高的工作,一般很少自行制备。
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过高的柱压:
虽然色谱柱能耐受的压力可达6000psi(磅/平方英寸),但过高及过大的压力变化均会缩短色谱柱的寿命,避免的方法是:
(1)柱压过高时,尽可能采用较小的流速,以不超过柱最大允许压力的一半为宜。
(2)当流速较大时,应采取流速梯度的办法使流速分步到位。
(3)使用手动进样阀时,进样阀的切换要尽可能的快。否则超过20%的压力冲击会很快使柱报废。当使用多柱联用时,柱切换要避免在高压下进行。